產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
一步法植物DNA純化試劑盒
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AQ101 |
BcMag ? 一步法植物DNA純化試劑盒 |
50 preps |
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AQ102 |
BcMag ? 一步法植物DNA純化試劑盒 |
100 preps |
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組件 |
存儲條件 |
50 preps，目錄號#AQ101 |
100 preps，目錄號#AQ102 |
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BcMag? U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
運(yùn)輸和儲存：根據(jù)上表，在收到貨物時(shí)儲存各組分。
一步法植物DNA純化試劑盒可以從各種植物樣品來源中，快速，無需離心柱提取出基因組DNA。本試劑盒使用獨(dú)特的專有磁珠和緩沖液，它可以有效地裂解細(xì)胞并去除雜質(zhì)，使DNA保持完整。通過同時(shí)處理>96個(gè)樣品，在不到30分鐘的時(shí)間內(nèi)提高核酸產(chǎn)量并最大程度地減少DNA損失。
簡介
植物基因組突變分析是植物遺傳學(xué)研究和經(jīng)濟(jì)作物改良研究中重要的一個(gè)研究方向。在其研究過程中，植物學(xué)家需要用到許多基因?qū)W研究工具來解決各種問題，如植物的抗病性、轉(zhuǎn)基因種子的產(chǎn)生、作物產(chǎn)量提高、群體遺傳學(xué)和植物生理學(xué)。在進(jìn)行可重復(fù)的DNA分析研究中，如實(shí)時(shí)定量PCR、基因測序分型（GBS）或新一代測序（NGS），需要從植物的葉片、種子、根或其他植物材料中提取出高質(zhì)量的DNA。
目前使用的提取植物DNA的標(biāo)準(zhǔn)程序，可能非常費(fèi)時(shí)和需要大量的人力參與。而且，在植物基因分型等特定實(shí)驗(yàn)中，更需要應(yīng)用對長鏈DNA提取的有效方法。例如，傳統(tǒng)的植物DNA提取方式，需要用蛋白酶K消化4小時(shí)甚至過夜，然后再用苯酚：氯仿提取和乙醇沉淀，非常費(fèi)時(shí)費(fèi)力。其他提取技術(shù)，如二氧化硅膜結(jié)合和洗脫試劑盒，近些年也已廣泛應(yīng)用在此提取領(lǐng)域。這些提取技術(shù)都是基于正色譜法的純化技術(shù)。該技術(shù)利用高濃度的解離鹽，如鹽酸胍，將DNA與二氧化硅膜結(jié)合。然后再用含有鹽/乙醇溶液的洗滌試劑清洗核酸結(jié)合后的硅膠柱或磁珠，以除去樣品中含有的雜質(zhì)類生物分子。最后，再使用Tris洗脫緩沖液或超純水洗脫下結(jié)合在純化柱或磁珠上的純凈DNA。這種結(jié)合-清洗-洗脫的核酸提取過程非常耗時(shí)，需要多次清洗和移液步驟。在重復(fù)的移液過程中，就會導(dǎo)致大量的DNA損失（20-40%）和斷裂。此外，高濃度的解離鹽和其他雜質(zhì)，很容易殘留到洗脫的DNA或RNA溶液中，影響核酸產(chǎn)物的最終純度和定量，以及下游反應(yīng)的酶活性，如PCR反應(yīng)。
BcMag? One-Step Plant DNA Purification Kit可以快速、無需純化柱等耗材，從各種植物樣品中提取出基因組DNA，包括葉、莖、芽、花、水果、種子等。該試劑盒使用我們獨(dú)特的專利磁珠和緩沖液，可以有效地裂解細(xì)胞，然后磁珠會有效的去除掉緩沖液中的所有雜質(zhì)，使DNA保留在上清液中。該提取過程采用溫和的裂解方式，避免了在苛刻的裂解條件下，如堿性裂解和使用有毒化學(xué)品用于裂解細(xì)胞對核酸的損害，這樣就保持了DNA完整性和去除了從樣品中清除有機(jī)溶劑的耗時(shí)過程。此外，本產(chǎn)品中的磁珠在不用于提取DNA的情況下，也可在單個(gè)步驟中用于從樣品中清除PCR抑制劑（圖1）。使用本試劑盒提取核酸增加了DNA的完整性，提高了核酸產(chǎn)量，并將傳統(tǒng)的DNA純化技術(shù)中耗時(shí)的“結(jié)合-洗滌-洗脫”過程造成的DNA損失降至最低。在將樣本完全裂解后，它能夠在不到30分鐘的時(shí)間內(nèi)完成超過96個(gè)樣品的DNA純化。純化出的基因組DNA具有高度的完整性，可用于各種下游應(yīng)用，如qPCR等。
圖1. PCR 抑制劑的清除
工作流程（圖2）
圖2：一步法植物DNA純化試劑盒工作流程
1.使用鋼珠將樣品打碎。
2.離心并將樣品粉碎的顆粒轉(zhuǎn)移到新試管中。
3.將樣品與磁珠和蛋白酶K混合并加熱以裂解細(xì)胞。
4.旋渦使磁珠與PCR抑制劑充分結(jié)合。
5.用磁力架清除磁珠。
6將含有純凈DNA的上清液轉(zhuǎn)移。
應(yīng)用
純化的DNA可用于下游應(yīng)用，例如PCR，qPCR，單核苷酸多態(tài)性（SNP），基因分型，測序基因分型（GBS），新一代測序（NGS）等。
特點(diǎn)和優(yōu)勢：
l 快速高效的純化方案：無需液體轉(zhuǎn)移，只需一個(gè)試管，無需事先分離DNA，可直接用于放大實(shí)驗(yàn)的工作流程。
l 節(jié)約時(shí)間成本：可在不到一小時(shí)內(nèi)處理96個(gè)樣本。
l 最高的核酸回收率：提取過程中的DNA損失最小。
l 有效去除抑制劑：多酚化合物、腐殖酸/黃腐酸、酸性多糖、鞣質(zhì)、黑色素、肝素、洗滌劑、牛仔布染料、二價(jià)陽離子，如Ca2+、Mg2+等（見圖片2“PCR抑制劑去除”）。
l 性價(jià)比高：無需離心柱、過濾器、不用反復(fù)的重復(fù)移液和使用有機(jī)試劑。
l 可用于高通量實(shí)驗(yàn)：與許多不同的全自動核酸提取系統(tǒng)兼容。
