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骨骼和牙齒DNA純化試劑盒

骨骼和牙齒DNA核酸純化試劑盒

骨骼和牙齒DNA純化試劑盒

 

貨號

產品名稱

規格


AB101

BcMag ? 骼DNA純化試劑盒

50preps


AB102

BcMag ? 骼DNA純化試劑盒

100preps


 

組件

存儲條件

目錄號:AB-10150Preps

目錄號:AB-102100 Preps 

BcMag? HO-DNA Beads

4°C

0.75 ml

1.5 ml

1x Lysis Buffer

4°C

5.0 ml

10 ml

1x Elution Buffer

4°C

1.5ml

3.0ml

Proteinase K (20mg/ml)

-20°C

10 mg

20 mg

Proteinase K Suspension Buffer

4°C

0.5 ml

1.0 ml

1 M DTT

-20°C

77 mg

154 mg

 

 

 

運輸條件:常溫運輸

搬運和儲存:根據上表在收到商品時儲存試劑盒中各組分。

簡介

骨骼和牙齒通常是鑒定人類遺骸的唯一DNA樣本。從骨骼和牙齒中純化出DNA在許多分子生物學應用中都很重要,包括法醫分析,古代DNA分析和遺傳研究。且從骨骼和牙齒等復雜樣品中有效提取DNA比使用新鮮的生物組織要困難得多。因為,骨骼是一種高度組織化、復雜化和專門化的結締組織,具有極高的鈣離子濃度。骨中的大部分DNA存在于骨細胞中。由于骨骼是具有高鈣含量的剛性結締組織,骨骼和牙齒中的DNA通常比軟組織中的DNA保存得更好。而骨骼中的牙齒則由牙釉質、牙本質、牙骨質和牙髓組織組成。牙本質和牙髓都含有DNA由于骨骼是高度礦化的組織,選擇有效的DNA提取方式,對于消除PCR抑制劑和避免DNA提取溶液中參雜過多礦物至關重要。

從長期暴露于各種環境條件下的骨骼和牙齒中提取DNA和進行STR數據分析,已成為識別失蹤人員和指認未知遺骸的有力工具。這類檢材由于礦化嚴重、內源性DNA含量低、收環境,細菌等影響、死后DNA損傷,以及存在與DNA樣本共同提取的環境物質中存在大量PCR抑制劑,因此,從受損樣本中回收DNA仍然具有挑戰性。盡管目前已經有一些核酸提取技術可用于骨骼DNA提取,但用于法醫檢測的骨骼核酸提取方式仍存在一些缺陷。在實驗過程中,DNA模板含量低、有顯著降解和普遍存在的PCR抑制成分,這些因素都會對樣本的識別造成影響,限制STR圖譜的發展。由于上述影響因素,選擇有效的DNA提取方式對于最大量減少礦物質提取時殘留和去除聚合酶鏈反應(PCR)抑制劑至關重要。

BcMag? Bone and Teeth DNA Purification Kit是經過獨特設計的,用于從骨骼和牙齒樣本中高效、有序地提取總核酸。該試劑盒使用我們獨特的專有磁珠與經過優化的脫礦緩沖液相結合,以提高DNA的產量和質量。純化的基因組DNA具有極高的完整性,可用于各種下游應用,如qPCRSTR等。該核酸提取過程采用溫和的裂解條件,避免了苛刻條件,如堿性裂解,和使用裂解細胞的有毒化學品對核酸的損害,以保持DNA完整性,并且提取過程無需耗時的從樣品中清除有機溶劑。

DNA分離的工作流程

1.向樣品中加入裂解緩沖液和蛋白酶K裂解骨骼,并在65°C下孵育24小時

2.添加功能性磁珠,并將磁珠與樣品一起渦旋或吹吸混勻,結合DNA

3.清

4.使用磁力分離器從樣品中分離磁珠

5.洗脫DNA

 

骨骼和牙齒DNA提取純化試劑盒用于多種分子生物學應用,包括:

?法醫分析:從骨頭和牙齒中提取的DNA通常用于法醫分析,以識別個人并破案。

?古代DNA分析:從骨骼和牙齒中提取的DNA可用于研究古代種群和物種的遺傳學。

?遺傳學研究:從骨骼和牙齒中提取的DNA通常用于遺傳學研究,以確定某些基因突變或標記的存在。

特點和優

?高質量DNA提取:骨骼和牙齒是難以液化的堅韌組織,但骨骼和牙齒DNA純化試劑盒提供了專門用于提取高質量DNA的試劑和方案。

?易于使用:骨骼和牙齒DNA純化試劑盒易于使用,為從骨骼和牙齒中純化DNA提供了一個簡單的操作過程。

?高產率:骨骼和牙齒DNA純化試劑盒旨在提高DNA提取的回收率,這對下游應用非常重要。

一般參考資料

1. Loreille OM, Diegoli TM, Irwin JA, Coble MD, Parsons TJ. High efficiency DNA extraction from bone by total demineralization. Forensic Sci Int Genet. 2007 Jun;1(2):191-5

2. Mckinnon M, Henneberg M, Higgins D. A review of the current understanding of burned bone as a source of DNA for human identification. Sci Justice. 2021 Jul;61(4):332-338.

3. Jakubowska J, Maciejewska A, Paw?owski R. Comparison of three methods of DNA extraction from human bones with different degrees of degradation. Int J Legal Med. 2012 Jan;126(1):173-8.

4. Emery MV, Bolhofner K, Winingear S, Oldt R, Montes M, Kanthaswamy S, Buikstra JE, Fulginiti LC, Stone AC. Reconstructing full and partial STR profiles from severely burned human remains using comparative ancient and forensic DNA extraction techniques. Forensic Sci Int Genet. 2020 May;46:102272.

5. Prediction of autosomal STR typing success in ancient and Second World War bone samples. Zupani? Pajni? I, Zupanc T, Bala?ic J, Ger?ak ?M, Stojkovi? O, Skadri? I, ?re?nar M. Forensic Sci Int Genet. 2017 Mar;27:17-26.

 

 

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